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紫外可見分光光度計常見問題解答

更新時間:2019-08-05點擊次數:4393

光源部分:
 

  (1)鎢燈不亮;
 

  原因:1.鎢燈燈絲燒斷(此種原因幾率高);
 

  檢查:鎢燈兩端有工作電壓,但燈不亮;取下鎢燈用萬用表電阻檔檢測。
 

  解決方法:更換新鎢燈;
 

  原因2. 沒有點燈電壓;
 

  檢查: 保險絲被熔斷;
 

  解決方法:更換保險絲,(如更換后再次燒斷則要檢查供電電路);
 

  (2)氘燈不亮;
 

  原因:1氘燈壽命到期(此種原因幾率高);
 

  檢查:燈絲電壓、陽極電壓均有,燈絲也可能未斷(可看到燈絲發紅);
 

  解決辦法:更換氘燈;
 

  原因:2.氘燈起輝電路故障;
 

  檢查:氘燈在起輝的過程中,一般是燈絲先要預熱數秒鐘,然后燈的陽極與陰極間才可起輝放電,如果燈在起輝的開始瞬間燈內閃動一下或連續閃動,并且更換新的氘燈后依然如此,有可能是起輝電路有故障,燈電流調整用的大功率晶體管損壞的幾率大。
 

  解決辦法:需要專業人士修理;
 

  二.信號部分:
 

  (1)沒有任何檢測信號輸出;
 

  原因:沒有任何光束照射到樣品室內;
 

  檢查:將波長設定為530nm,狹縫盡量開到寬檔位,在黑暗的環境下用一張白紙放在樣品室光窗出口處,觀察白紙上有無綠光斑影像;
 

  解決辦法:檢查光源鏡是否轉到位?雙光束儀器的切光電機是否轉動了(耳朵可以聽見電機轉動的聲音)?
 

  (2)樣品室內無任何物品的情況下,全波長范圍內基線噪聲大;
 

  原因:光源鏡位置不正確、石英窗表面被濺射上樣品;
 

  檢查:觀察光源是否照射到入射狹縫的中央?石英窗上有物?
 

  解決辦法:重新調整光源鏡的位置,用乙醇清洗石英窗;
 

  (3)樣品室內無任何物品的情況下,僅僅是紫外區的基線噪聲大;
 

  原因:氘燈老化、光學系統的反光鏡表面劣化、濾光片出現結晶物;
 

  檢查:可見區的基線較為平坦,斷電后打開儀器的單色器及上蓋,肉眼可以觀察到光柵、反光鏡表面有一層白色霧狀物覆蓋在上面;如果光學系統正常,大的可能是氘燈老化,可以通過能量檢查或更換新燈方法加以判斷;
 

  解決辦法:更換氘燈、用火棉膠粘取鏡面上的污物或用研磨膏研磨濾光片(注意:此種技巧需要有一定維修經驗者來實施);
 

  (4)樣品室放入后做基線記憶,噪聲較大,紫外區尤甚;
 

  原因:比色皿表面或內壁被污染、使用了玻璃比色皿或樣品對紫外光譜的吸收太強烈,使放大器超出了校正范圍;
 

  檢查:將波長設定為250nm,先在不放任何物品的狀態下調零,然后將空比色皿插入樣品道一側,此時吸光值應小于0.07Abs;如果大于此值,有可能是比色皿不干凈或使用了玻璃比色皿;同樣方法也可判斷溶液的吸光值大小;
 

  解決辦法:清洗比色皿,更換溶液;
 

  (5)吸光值結果出現負值(常見);
 

  原因:沒做記憶、樣品的吸光值小于參比液;
 

  檢查:將參比液與樣品液調換位置便知;
 

  解決辦法:做記憶、調換參比液或用參比液配置樣品溶液;
 

  (6)樣品信號重現性不良;
 

  原因:排除儀器本身的原因外,大的可能是樣品溶液不均勻所致;在簡易的單光束儀器中,樣品池架一般為推拉式的,有時重復推拉不在同一個位置上;
 

  檢查:更換一種穩定的試樣判定;
 

  解決辦法:采取正確的試樣配置手段;修理推拉式樣品架的定位碰珠;
 

  (7)做基線掃描或樣品掃描時,基線或信號有一個大的負脈沖;
 

  原因:掃描速度設置得過快,信號在讀取時,誤將濾光片或光源鏡的切換當做信號讀取了;
 

  檢查:改變掃描速度;
 

  (8)做基線掃描或樣品掃描時,基線或信號有一個長時間段的負值或滿屏大噪聲;
 

  原因:濾光片飼服電機“失步”,造成檔位錯位,國產電機尤甚;
 

  檢查:重新開機有可能回復,或打開單色器對照波長與濾光片的相對位置來檢查(注意:打開單色器時要保護檢測器不被強光刺激);
 

  解決辦法:更換飼服電機;
 

  (9)樣品出峰位置不對;
 

  原因:波長傳動機構產生位移;
 

  檢查:通過氘燈的656.1nm的特征譜線來判斷波長是否準確;
 

  解決辦法:對于儀器而言處理手段相對簡單,使用儀器固有的自動校正功能即可;而對于相對簡單的儀器,這種調整則需要專業人員來進行了;
 

  (10)信號的分辨率不夠,具體表現是:本應疊加在某一大峰上的小峰無法觀察到;
 

  原因:狹縫設置過窄而掃描速度過快,造成檢測器響應速度跟不上,從而失去應測到的信號;按常理,一定的狹縫寬度要對應一定范圍的掃描速度;或者狹縫設置得過寬,使儀器的分辨率下降,將小峰融合在大峰里了。
 

  檢查:放慢掃描速度看一看或將狹縫設窄;
 

  解決辦法:將掃描速度、狹縫寬窄、時間常數三者擬合成一個優化的條件;
 

  (11)當儀器波長固定在某個波長下時,吸光值信號上下擺動,特別是測量模式轉換為按鍵開關式的簡易儀器;
 

  原因:開關觸點因長期氧化所致造成接觸不良;
 

  檢查:用手加重力量按琴鍵時,吸光值隨之變化;
 

  解決辦法:用金屬活化劑清洗按鍵觸點即可;
 

  (12)儀器零點飄忽不定,主要反映在簡易儀器上;
 

  原因:在簡易儀器中,零點往往是通過電位器來調整,這種電位器一般是炭膜電阻制作的,使用久了往往造成接觸不良;
 

  解決辦法:更換電位器;
 

  還有一點補充一下,如果是PC連接UV時,同志們一定注意接口板別不小心被擊穿,一定要關機后拔插.若可見部分穩定性不好,有可能是鎢燈的供電電壓不穩,一般鎢燈電源是穩壓電路
 

  (13)在使用過程中,出現數字顯示不能歸零,同時伴有圖線記錄基線位置偏高。
 

  可能原因:
 

  ①光電倍增等老化,性能降低;
 

  ②信號處理板可能發生故障;
 

  ③前置放大版出現故障,引起反饋量增大。
 

  解決辦法:
 

  ①開機通電,先做記錄故障曲線,再與原始記錄的標準曲線對照,找出異同點,并作一下定性定能分析。然后用一只同型號規格的新光電倍增管替換機上的光電管,再開機實驗,結果記錄出來的圖線并沒有什么變化,由此證明光電倍增管沒有老化變質。
 

  ②進一步檢查信號處理板,未發現信號處理板各元器件損壞,對影響靈敏度有關的電位器檢測,結果測得數據正常,這說明信號處理板*。
 

  ③由 于對以上分析,故障發生在前置級放大板可能性很大。應采用模擬測試對前置放大板進行測量,先利用直流穩壓電源,把各供電電源加上,使其電路單獨工作,用信 號發生器發出的信號加到輸入端。再用示波器接在輸出端測量輸出信號,將輸入信號與輸出信號對比,結果波形相同,說明電路*。用相同方法對一個帶驅動 器的開關管測量,輸入端加入信號后,用示波器未能測出輸出端信號,判斷開關管壞,換上同一型號規格的開關管,恢復正常。
 

  (14)儀器掃描樣品時,顯示一條直線。
 

  可能原因:軟件出現故障。
 

  解決辦法:退出操作系統,重新啟動計算機,再次掃描。
 

  (15)紫外可見分光光度計接通電源后,光源不亮。
 

  可能原因:
 

  ①光源燈泡已損壞;
 

  ②保險管燒壞。
 

  解決辦法:更換氘燈或鎢燈;更換保險管。
 

  (16)儀器自檢時提示通訊錯誤。
 

  可能原因:儀器與電腦之間的數據線沒有連接好。
 

  解決辦法:連接好數據線,重新打開儀器和軟件,重新自檢。
 

  (17)自檢時提示波長自檢出錯。
 

  可能原因:自檢過程中可能打開過儀器樣品室的蓋子。
 

  解決辦法:關上儀器樣品室蓋子,重新自檢。
 

  (18)測試過程中提示能量太低。
 

  可能原因:
 

  ①光源燈泡使用時間超過壽命期;
 

  ②樣池中有不透光的東西擋住了光。
 

  解決辦法:更換光源燈泡;拿走擋光的物品
 

  三、使用技巧
 

  (1)不使用氘燈時如何關閉氘燈
 

  當連接儀器時,選擇儀器>配置>保養標簽,然后點擊氘燈邊上的燈狀態框,除去復選標記。只要掃描范圍和固定波長測定不在氘燈的范圍之內時,氘燈將處于關閉狀態。
 

  (2)如何決定所用的通帶
 

  選擇測定光譜中窄峰的半高度,然后除以10。例如峰的半高度寬是20nm,通帶的優選值是2nm。
 

  (3)初始化剛完成,使用哪條基線
 

  使用后一次存儲的基線。儀器在初始化時不進行基線校正。可掃描一次零線,看基線是否完好,如果可以,就使用存在的基線。儀器在出廠時存儲有基線。如果未進行過基線校正,則使用的是出廠時的基線。
 

  (4)如果發生通訊故障,應該檢查哪些項目
 

  ①檢查在儀器配置屏幕(選擇儀器>配置)中是否選擇了合適的通訊口;
 

  ②檢查電纜是否正確,牢固地連接
 

  ③檢查儀器的電源是否已經打開
 

  (5)燈是如何進行準直的
 

  實際上燈并不移動。在初始化時,驅動燈反光鏡的步進馬達連接有傳感器,當檢測器發現能量大時,反饋信號到燈室,步進馬達的傳感器自動記憶此時的反光鏡位置。當檢查所有的位置后,反光鏡自動返回到記憶的位置。
 

  (6)紫外區讀數漂移的原因
 

  確認氘燈是否點亮。氘燈的使用時間是否超過了預期的500h壽命,一旦超過,光強減弱,也許需要更新。此外可檢查夾縫寬度的設置是否太小。
 

  (7)執行了自動調零后儀器處于什么狀態
 

  自動調零把當前固定波長的光度讀數調節為0或者,取決于測定的方式。使用自動調零減去了讀數。通常,在單個固定波長測定時使用自動調零,如果是多波長測定,應該執行基線校正。
 

  (8)為什么執行自動調零后光譜仍然沒有得到有效的校正
 

  因為自動調零只校正一個點;要校正光譜范圍,需要進行基線校正或精細的基線校正。精細的基線校正應該定期進行,一般每月一次,在樣品室中不必放任何容器。
 

  (9)基線校正后儀器的狀態如何?
 

  基線校使時儀器在制定得波長范圍內的光譜讀數調整為零。
 

  (10)為什么基線校正不能正常起作用
 

  是否樣品室中放了樣品?基線校正時有三種選擇,可確保基線校正的正常。
 

  ①樣品室池架內空置(空氣對空氣)。此時校正儀器的基線,特別適合精細的基線校正
 

  ②樣品池中放入溶劑,參比側空置
 

  ③樣品和參比池中都放入溶劑
 

  需要確認樣品室的門已經關好。雜散光會影響基線的質量。此外,在的波長范圍內溶劑和樣品池的材料匹配。
 

  (11)夾縫寬改變以后情況如何
 

  多數場合下(紫外/可見區),設置夾縫寬也等于設置了帶寬,換言之設置了光譜的分辨率。夾縫寬改變,改變了光束的集合尺寸。在使用微量池和流通池時就要權衡考慮,增加夾縫寬可增加光通量降低噪聲。但是,使用大的夾縫寬,噪聲是降低了,付出的代價是分辨率也隨之降低了。
 

  (12)為什么有時在儀器初始化中會出現氘燈能量或波長正確度故障
 

  出現上述現象的原因可能如下。
 

  ①樣品盒參比池中有樣品池
 

  ②使用某些附件,如池定位裝置、抽吸單元等,沒有坐落在正確的位置上或未準直。
 

  ③如果安裝了抽吸單元,流通池臟了、空了或沒有準直。
 

  ④氘燈的使用時間接近或超過預期的500h壽命,燈的能量降低乃不能通過能量檢查,并且由于噪聲增加,使波長正確度的檢查也失敗。此時,換新的燈一切問題迎刃而解。

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